Verminderde regeneratieve capaciteit van bronchiaal epitheel door ioniserende straling

Radiation-induced lung injury (RILI) is een ernstige bijwerking van radiotherapie voor longkanker, waarbij schade aan het normale longepitheel een cruciale rol kan spelen. De exacte mechanismen achter deze schade zijn echter nog onvolledig begrepen. Dit onderzoek richt zich op de effecten van ioniserende straling (IR) op goed gedifferentieerde primaire bronchiale epitheelcellen (PBEC), met specifieke aandacht voor cytotoxiciteit, barrièrefunctie, ontsteking en de functie van epitheliale progenitorcellen. Methodologie PBEC werden gedurende 14 dagen gekweekt aan het air-liquid interface (ALI-PBEC) om mucociliaire differentiatie te bereiken. De effecten van IR (1, 2, 4 en 8 Gy) werden geëvalueerd aan de hand van lactaatdehydrogenase (LDH)-afgifte en trans-epitheliale elektrische weerstand (TEER) als markers voor cytotoxiciteit en barrièrefunctie. De expressie van genen gerelateerd aan celcyclusregulatie (P21/CDKN1A, MKI67, E2F1, AEN), ontsteking en epitheliale-mesenchymale transitie (EMT) werd bepaald met qPCR. Daarnaast werd DNA-schade geanalyseerd door immunofluorescentie van γH2Ax-foci en werd de progenitorfunctie beoordeeld via een organoïdevormingstest op 24 uur en 7 dagen na…